近日，北京中醫(yī)藥大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院李曉驕陽(yáng)教授課題組在Journal of Advanced Research雜志（綜合性期刊1區(qū)TOP）上發(fā)表題為 “Senkyunolide A interrupts TRAF6-HDAC3 interaction to epigenetically suppress c-MYC and attenuate cholestatic liver injury”的研究性文章。該成果聚焦膽汁淤積性肝損傷，結(jié)合組學(xué)分析、化合物合成及分子生物學(xué)等技術(shù)手段，闡明川芎中主要活性成分洋川芎內(nèi)酯A（SenA）的保護(hù)作用及表觀(guān)遺傳調(diào)控機(jī)制。李曉驕陽(yáng)教授為該文章的通訊作者，課題組畢業(yè)博士李雅靜為第一作者。
課題組多年來(lái)聚焦川芎提取物及代表性成分的抗肝纖維化及肝損傷作用研究，并取得系列研究成果。川芎具有活血行氣、祛風(fēng)止痛的功效，可用于治療胸痹心痛及肝郁氣滯等病。川芎主要包含生物堿、酚酸及苯酞類(lèi)活性成分，其中洋川芎內(nèi)酯A為川芎代表性苯酞類(lèi)成分。膽汁淤積性肝病是多種肝膽類(lèi)疾病的共同病理特征，但目前仍缺乏有效的治療手段。本研究通過(guò)CHIP-qPCR、Co-IP、膽管細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序及化合物變構(gòu)合成等方法證明：（1）SenA可有效抑制BDL引起的小鼠體內(nèi)肝損傷及膽管細(xì)胞異常增殖及TCA誘導(dǎo)的膽管反應(yīng)；（2）SenA通過(guò)抑制c-MYC及下游LncH19、Let-7a及Lin28a減輕膽管細(xì)胞異常增殖；（3）SenA中羰基可結(jié)合TRAF6中Arg483位點(diǎn)，破壞TRAF6與HDAC3結(jié)合，從而降低了HDAC3泛素化，增加HDAC3與c-MYC啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合，最終導(dǎo)致組蛋白去乙酰化及c-MYC轉(zhuǎn)錄抑制。
通過(guò)結(jié)合病理染色、轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)及多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，研究人員發(fā)現(xiàn)SenA可顯著修復(fù)BDL引起的膽管反應(yīng)及膠原堆積，隨后提取干預(yù)后小鼠原代膽管細(xì)胞進(jìn)行RNA測(cè)序后初步明確了SenA對(duì)膽管細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期的抑制作用。同時(shí)，在人源膽管細(xì)胞HIBEC中觀(guān)察到SenA可下調(diào)c-Myc、Let7a、Lin28a及Cdk2等增殖相關(guān)基因的表達(dá)水平。研究人員通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)錄數(shù)據(jù)中差異表達(dá)基因的關(guān)鍵靶點(diǎn)深入分析，聚焦在c-Myc轉(zhuǎn)錄調(diào)控的組蛋白乙?；凡⑦M(jìn)行深入探索。機(jī)制研究表明，SenA可通過(guò)恢復(fù)組蛋白去乙酰化酶活性調(diào)節(jié)H3K9ac，且其主要作用靶點(diǎn)為HDAC3。進(jìn)一步研究表明，TRAF6可與HDAC3形成復(fù)合物并引起HDAC3泛素化，而SenA與TRAF6的結(jié)合恰可破壞TRAF6-HDAC3復(fù)合物。研究人員隨后通過(guò)SPR、MST、Co-IP等多種分子生物學(xué)手段及藥物合成方法明確了TRAF6的Arg483與TRAF6的羰基結(jié)合。
SenA改善膽汁淤積性肝損傷的機(jī)制模式圖
該研究成果為李曉驕陽(yáng)團(tuán)隊(duì)川芎系列研究的又一階段性成果，是多年學(xué)術(shù)積淀的體現(xiàn)。本研究通過(guò)環(huán)環(huán)相扣的溯源分析與實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，明確了SenA對(duì)c-Myc啟動(dòng)子區(qū)域組蛋白乙酰化H3K9ac的調(diào)控后尋找其上游的關(guān)鍵酶HDAC3，并進(jìn)一步明確SenA通過(guò)與TRAF6結(jié)合破壞TRAF6-HDAC3復(fù)合物。最終，通過(guò)化合物變構(gòu)、蛋白變構(gòu)等手段驗(yàn)證TRAF6 Arg483與SenA羰基形成氫鍵，揭開(kāi)SenA表觀(guān)遺傳調(diào)控H3K9ac的神秘面紗，為中藥及其活性成分的作用機(jī)制研究提供了參考范式。
Journal of Advanced Research（ISSN：2090-1232，e-ISSSN：2090-1224）位列綜合性期刊1區(qū)TOP，該期刊專(zhuān)注基礎(chǔ)科學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域，旨在通過(guò)在上述領(lǐng)域發(fā)表原創(chuàng)、高質(zhì)量的研究文章，為全球的醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究做出貢獻(xiàn)。
